使用血液細(xì)胞分析儀有關(guān)問題解答
1 血液細(xì)胞分析儀有哪些發(fā)展?
隨著電子學(xué)、光學(xué)、機械學(xué)、化學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科的迅速發(fā)展, 特別是電子計算機的應(yīng)用, 各種高科技組合應(yīng)用使血液學(xué)自動分析進入了新階段。細(xì)胞類型識別技術(shù)除采用電阻抗識別體積外, 采用高頻電流測量細(xì)胞對其傳導(dǎo)性以檢測胞核與細(xì)胞質(zhì)的比例, 再用光散射測出細(xì)胞內(nèi)顆粒等綜合特征來識別, 也有用激光與細(xì)胞化學(xué)及激光與偏振光技術(shù)的血液細(xì)胞分析儀使白細(xì)胞分類技術(shù)更加準(zhǔn)確。有的儀器還可以分別測量紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白分布寬度, 白細(xì)胞過氧化酶指數(shù), 顯示粒細(xì)胞左移程度的左移指數(shù), 淋巴細(xì)胞亞群分析, 熒光分析網(wǎng)織紅細(xì)胞并區(qū)分為低熒光強度網(wǎng)紅(LFR) , 中熒光強度網(wǎng)紅(MFR) 及高熒光強度網(wǎng)紅(HFR) 等。隨著計算機技術(shù)的進步, 生產(chǎn)血液細(xì)胞分析儀的廠家紛紛采用先進的微機配備軟件使全血標(biāo)本的混勻、吸樣、加試劑、計數(shù)、識別及打印結(jié)果等步驟實現(xiàn)自動化; 定時自動清洗, 故障顯示, 試劑、質(zhì)控物是否失效, 貯存、查詢檢測結(jié)果及質(zhì)控數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析等。
這些組合為現(xiàn)代血液細(xì)胞分析儀走向智能化和全實驗室自動化創(chuàng)造了條件。
2 如何選購一臺合格的血液細(xì)胞分析儀?
當(dāng)前市場上血液細(xì)胞分析儀的品種繁多, 如何正確選擇是廣大臨床實驗室工作者很關(guān)心而經(jīng)常提出并想了解的,建議在選購時考慮以下問題:
2.1 選購前的準(zhǔn)備。必需積累血液細(xì)胞分析儀的基本知識, 了解有哪些類型及其發(fā)展趨勢? 其測試原理是電阻法還是激光法? 是射頻還是光散射? 是多角度偏振光散射?還是組織化學(xué)等? 這臺儀器的主要性能? 可以測定哪些參數(shù)? 樣本量是25μl 末梢血還是60~125μl 靜脈血? 測定速度是40 s、60 s、72 s ? 在選型時還應(yīng)按照本實驗室的工作范圍、工作量考慮, 是用于門診檢查、還是病房病人? 用在臨檢一般分析還是科學(xué)研究? 對選擇儀器性能與要求有所區(qū)別。在考慮有利于病人社會效益的同時也考慮經(jīng)濟效益, 即每天測定標(biāo)本的收益, 一臺儀器何時收回成本?
2.2 選三分類還是五分類? 根據(jù)醫(yī)院等級考慮在三級醫(yī)院可綜合前述選擇有綜合特征識別功能的五分類儀器, 因其性能好, 自動化、智能化程度高, 但價格不菲。在二級醫(yī)院多選擇價格適中的普及型三分類儀器, 這類儀器又因分析參數(shù)的多少及自動化程度不同價格相差較大, 而一級醫(yī)院或鄉(xiāng)鎮(zhèn)、街道醫(yī)院因工作量不大可選沒有分類功能但能計數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板等7~8 參數(shù)的半自動或全自動儀器。
2.3 重視醫(yī)院發(fā)展, 考慮性能價格比及做好廠商及用戶調(diào)查研究工作。一般選購一臺血液細(xì)胞分析儀要考慮3~5 年醫(yī)院的發(fā)展, 對其性能不能只聽廠商介紹, 要按廠商提供附近有同類儀器的醫(yī)療單位去參觀、請教, 他們在使用中有哪些經(jīng)驗和體會? 碰到哪些問題? 對儀器如何評價? 最 好能自己動手做一下重復(fù)測試, 以觀察儀器性能; 對廠商提供的新型儀器要仔細(xì)閱讀儀器說明書及用戶的使用報告,進一步了解使用和維護的要點及是否有良好的售后服務(wù)等。綜合考慮作出決擇。
3血液細(xì)胞分析儀易出現(xiàn)的故障有哪些? 如何排除?目前國內(nèi)所使用的血液分析儀主要為阻抗型儀器, 盡管機械部分不斷改進及采用電腦使儀器操作簡便, 便于維護保養(yǎng), 但在使用過程中仍可出現(xiàn)故障。最常見的為檢測器的微孔堵塞, 其他還可見接插件連接松弛等非電子類故障, 操作者不熟悉或疏忽及環(huán)境溫度、濕度、不合適試劑應(yīng)用等其他原因均可導(dǎo)致故障。檢測器的微孔堵塞分為完全堵孔和不完全堵孔兩類。完全堵孔由于不顯示檢測結(jié)果或屏幕上有“Clog”標(biāo)志易于識別。而不全堵孔可根據(jù)觀察計數(shù)時間改變, 示波器上出現(xiàn)異常圖形, 儀器發(fā)出不規(guī)則聲音, 或計數(shù)指示燈閃動等加以判斷。
監(jiān)護儀廠家分析堵孔原因常見為①采血時用棉簽、棉球擦拭吸樣管致棉纖混入血樣中; ②采血部份溫度低或穿刺過淺, 出血不順, 采末梢血過度擠壓致形成纖維蛋白絲, 血小板聚集或生成小凝塊; ③血標(biāo)本通過微孔計數(shù)時, 其中蛋白質(zhì)產(chǎn)生變性沉淀在微 孔內(nèi)而未經(jīng)及時清洗; ④標(biāo)本杯未加蓋, 致空氣中污物、塵埃進入(此時杯中液面上發(fā)現(xiàn)黑黃色顆粒漂浮物) ; ⑤儀器長期擱置不用, 試劑中水分蒸發(fā), 鹽類結(jié)晶堵塞。預(yù)防堵孔的方法最 好是能在血樣稀釋液的通道上設(shè)置濾網(wǎng)增加防堵性; 增加樣品針內(nèi)外自動清洗功能; 對試劑采取恒溫措施; 也有用高壓電子束燒穿技術(shù)等。針對上述原因可采用衛(wèi)生紙代替棉花, 采血時順利取血, 防塵, 不用儀器時將檢測器浸泡在含稀的非離子表面活性劑中(不可浸泡在稀釋液中) ; 采用多種方式清洗檢測器, 如計數(shù)期每檢測一批標(biāo)本, 按幾次儀器的反沖裝置, 以沖掉剛沉淀的變性蛋白質(zhì); 在每日工作完畢時, 用清洗劑(不是稀釋液) 清洗檢測器3 次, 并將檢測器浸泡在清洗劑中; 在每周周末, 卸下檢測器用3~5 g/ dl 的次氯酸鈉溶液浸泡數(shù)分鐘用清洗液沖洗后在顯微鏡下觀察微孔的清潔度, 如發(fā)生堵孔可用軟毛刷刷去微孔臟物, 或在反沖裝置下刷微孔。如仍無效可卸下檢測器, 裝入蒸餾水后用洗耳球從其頂端輕輕加壓使水從微孔射出沖走污物, 有人介紹用不損傷微孔的軟頭發(fā)絲來通。對血凝塊、纖維絲團、大顆粒灰塵所致嚴(yán)重堵死的微孔, 清洗時應(yīng)特別小心, 不致?lián)p傷微孔。
這些方法如無效, 則可通過3~5 g/ dl 次氯酸的浸泡后再清洗以去除變性蛋白質(zhì)。
4 怎樣使用及維護好一臺血液細(xì)胞分析儀?
工作人員的素質(zhì)、責(zé)任心是保證用好精密儀器的前提。①要指定經(jīng)過正規(guī)檢驗專業(yè)學(xué)習(xí)、有事業(yè)心的人負(fù)責(zé)儀器管理和維護, 仔細(xì)閱讀說明書, 充分了解儀器的原理、結(jié)構(gòu)、操作步驟及校準(zhǔn)規(guī)程, 掌握維護保養(yǎng)和簡單故障排除知識; ②創(chuàng)造良好使用環(huán)境: 儀器室要求密閉性好, 清潔無塵, 室溫18 ℃~25 ℃, 相對濕度小于80 %; 要有穩(wěn)定的電源, 應(yīng)配不間斷電源(UPS) , 安裝儀器專用、有效的地線, 以確保儀器不受干擾及人身安全; 要遠(yuǎn)離大功率電器機房, 如放射線機器等, 不能與這些設(shè)備使用同一路電源;
③新購儀器應(yīng)使用原廠提供配套試劑, 使用正常后方可使用國產(chǎn)商品試劑替代, 但必須有國家批準(zhǔn)號, 經(jīng)pH、滲透壓、離子強度、電導(dǎo)率等批檢驗定論證合格者, 以保證檢驗質(zhì)量; ④充分抗凝和混勻、全自動血液細(xì)胞分析儀因用血量大必須用靜脈血加EDTA·K2 充分抗凝的抗凝全血, 在上機前血樣應(yīng)在滾動式混勻器上充分混勻。血樣取出后應(yīng)在10 分鐘后4 小時內(nèi)完成檢測; ⑤應(yīng)注意儀器檢測的局限性, 除規(guī)定完成室內(nèi)質(zhì)量控制的檢測項目外, 對白細(xì)胞分類, 血小板計數(shù), 有的儀器僅起過篩作用。面對血液中各種細(xì)胞的多形態(tài), 多變化性, 儀器識別能力有限, 因此不能取代顯微鏡檢查。不少使用三分類儀器的單位, 在采集血樣后即作涂片1 張, 以便儀器檢測有疑問時染色鏡檢是完全